Optimization of a molecular method for the diagnosis of canine babesiosis / Otimização de método molecular para diagnóstico da babesiose canina

Babesiosis is a hemolytic disease caused by protozoans of the genus Babesia (Apicomplexa). This disease occurs worldwide and is transmitted by ticks to a variety of mammals, including humans. The objective of the present study was to optimize a molecular approach for the detection of a fragment of 18S rDNA of Babesia canis, Babesia vogeli, Babesia rossi or Babesia gibsoni based on a single semi-nested Polymerase Chain Reaction (PCR), and compare the efficiency of this approach with that of a simple PCR protocol. To this end, 100 blood samples collected from dogs with suspected hemoparasite infections were analyzed. A comparison of the results of simple PCR and semi-nested PCR indicated a highly significant difference (p value = 0.0000). While only five (5%) of the samples tested positive using the simple protocol, 22 (22%) were positive using the snPCR technique. The results of this study reinforce the findings of previous studies, which have demonstrated the greater sensitivity of tests based on nested or semi-nested PCR. Therefore, to avoid false-negative results due to low levels of parasitemia, we suggest the preferential use of this protocol in epidemiological studies of canine babesiosis, particularly those that require reliable estimates of the prevalence of infection.

A babesiose é uma doença hemolítica de ocorrência mundial, causada por protozoários do gênero Babesia (Apicomplexa), que são transmitidos por carrapatos a diversos mamíferos, incluindo o homem. O objetivo deste estudo foi otimizar um método molecular para a detecção de fragmento do 18S rDNA de Babesia canis, Babesia vogeli, Babesia rossi ou Babesia gibsoni com base em uma única semi-nested (snPCR), comparando sua eficiência com um protocolo de PCR simples. Para isso, 100 amostras de sangue de cães com suspeita de hemoparasitoses foram analisadas e, enquanto o protocolo de PCR simples indicou somente 5% (5/100) de amostras positivas, o protocolo de snPCR, com 22% (22/100) de amostras positivas, apresentou maior sensibilidade (p valor = 0,0000). Este resultado está de acordo com outros estudos que mostram a maior sensibilidade de detecção dos testes baseado em nested ou snPCR. Assim, como uma forma de prevenir resultados falso-negativos devido à baixa parasitemia, sugere-se que este protocolo seja preferencialmente usado nos estudos epidemiológicos de babesiose canina, em especial naqueles que tratam da sua prevalência.

Immunodetection of Helicobacter sp. and the associated expression of ABO blood group antigens in the gastric mucosa of captive and free-living New World primates in the Amazon region

The histo-blood group ABH antigens were first described in humans. These antigens are only present on erythrocytes from great apes and humans, while in more primitive animals they are found in tissues and body fluids. The ABH antigens are mainly distributed in tissues exposed to the external environment and potentially serve as ligands for pathogens or inhibitors of tissue connections. The objective of this paper was two-fold: (i) to determine the presence of Helicobacter sp. in the gastric mucosa of 16 captive and 24 free-living New World monkeys and (ii) to evaluate the presence of histopathological alterations related to bacterial infection and the associated expression of ABH antigens in the tissue. Stomach tissues from 13 species of monkey were assessed using haematoxylin-eosin and modified Gram staining (Hucker) methods. An immunohistochemical analysis of the tissue revealed the presence of infectious bacteria that were characteristic of the genus Helicobacter sp. The results demonstrate that various species of monkey might be naturally infected with the Helicobacter sp. and that there is an increased susceptibility to infection. This study serves as a comparative analysis of infection between human and non-human primates and indicates the presence of a new species of Helicobacter.

Expressäo dos antígenos ABH e Lewis na gastrite crônica e alteraçöes pré-neoplásica da mucosa gástrica / Expression of ABH and Lewis antigens in chronic gastritis and pre-neoplasic alterations in gastric mucosa

RACIONAL: A aderência do Helicobacter pylori à mucosa gástrica humana é pré-requisito para sua colonizaçäo e o desenvolvimento da gastrite crônica. Os antígenos de grupos sangüíneos, presentes no muco gástrico, säo descritos como prováveis receptores da bactéria neste epitélio. A expressäo alterada destes antígenos está associada ao desenvolvimento do câncer gástrico. OBJETIVOS: Verificar a ocorrência do Helicobacter pylori e a distribuiçäo da expressäo dos antígenos ABH e Lewis correlacionada com as alteraçöes histopatológicas de pacientes com gastrite crônica. PACIENTES E MÉTODOS: Analisaram-se 63 amostras de sangue, saliva e biopsias gástricas de pacientes com gastrite crônica através das técnicas dot-blot-ELISA, imunoperoxidase indireta e coloraçöes do Gram modificado e hematoxilina-eosina. RESULTADOS: Näo foram encontradas associaçöes significativas entre a presença da bactéria e os fenótipos de grupos sangüíneos ABH, Lewis e Secretor. Na maioria dos pacientes, a expressäo dos antígenos ABH e Lewis, estava restrita principalmente ao epitélio foveolar da mucosa gástrica, concordando com a expressäo ao nível salivar. A expressäo inapropriada desses antígenos ocorria sempre na infecçäo pelo Helicobacter pylori e/ou alteraçöes pré-neoplásicas da mucosa gástrica. Em áreas com metaplasia intestinal foi observada a reduçäo da reatividade para os antígenos H e Le b, e principalmente o aumento de Leª. CONCLUSÄO: Alteraçöes no padräo de glicosilaçäo destes antígenos refletem diferentes estágios de diferenciaçäo celular e säo marcadores potenciais na avaliaçäo diagnóstica e prognóstica das patologias gástricas